二氧化碳濃度培養(yǎng)箱作為細胞培養(yǎng)、組織工程與生命科學(xué)研究的設(shè)備,其環(huán)境穩(wěn)定性直接決定細胞生長狀態(tài)與實驗成敗。然而,
二氧化碳濃度培養(yǎng)箱在長期運行中,受氣源波動、操作不當、維護缺失等因素影響,常出現(xiàn)CO2濃度失控、溫度異常、污染滋生等問題,輕則導(dǎo)致細胞生長緩慢,重則造成實驗失敗。

 
  一、CO2濃度波動大或無法達到設(shè)定值
  現(xiàn)象:顯示濃度忽高忽低,或長時間無法穩(wěn)定在5%。
  原因與解決方法:
  原因1:CO2氣源壓力不足或純度不夠
  氣瓶余量過低(壓力<0.3MPa)或使用非高純CO2(≥99.9%)。
  解決:檢查氣瓶壓力,及時更換;確保使用醫(yī)用或高純級CO2。
  原因2:管路泄漏或接頭松動
  連接氣瓶與培養(yǎng)箱的硅膠管老化、開裂,或接頭未擰緊。
  解決:用肥皂水涂抹管路接口,觀察是否冒泡;更換老化管路,確保連接密封。
  原因3:紅外傳感器污染或需校準
  培養(yǎng)箱內(nèi)揮發(fā)物附著傳感器窗口,影響檢測精度。
  解決:清潔傳感器窗口(按說明書操作);定期(每6–12個月)使用標準氣體進行校準。
  二、溫度無法恒定或均勻性差
  現(xiàn)象:箱內(nèi)溫度高于/低于設(shè)定值,或不同位置溫差大。
  原因與解決方法:
  原因1:門封條老化或破損
  密封不嚴導(dǎo)致熱量散失,冷熱空氣對流。
  解決:檢查門封是否變形、開裂,用酒精清潔后涂抹硅脂;嚴重時更換封條。
  原因2:放置物品過多或遮擋風(fēng)道
  影響熱空氣循環(huán),形成“冷區(qū)”或“熱區(qū)”。
  解決:合理擺放培養(yǎng)瓶/皿,確保箱內(nèi)氣流暢通,不遮擋風(fēng)機與出風(fēng)口。
  原因3:溫度傳感器故障
  傳感器漂移或損壞。
  解決:使用標準溫度計多點驗證,必要時聯(lián)系廠家更換。
  三、濕度偏低,培養(yǎng)液蒸發(fā)快
  現(xiàn)象:水盤干涸,培養(yǎng)基體積減少,滲透壓升高。
  原因與解決方法:
  原因1:水盤缺水
  蒸發(fā)或未及時添加。
  解決:每日檢查水位,使用無菌蒸餾水或去離子水補充至刻度線。
  原因2:開門頻繁或時間過長
  濕潤空氣逸出,干燥空氣進入。
  解決:縮短開門時間,預(yù)熱移液器等工具,減少箱內(nèi)操作時間。
  原因3:HEPA過濾器堵塞
  影響空氣循環(huán),降低加濕效率。
  解決:定期更換HEPA過濾器(通常每年一次)。
  四、箱內(nèi)污染(細菌、霉菌、支原體)
  現(xiàn)象:培養(yǎng)液渾濁、pH異常、鏡下見微生物。
  原因與解決方法:
  原因1:未定期清潔消毒
  水盤、內(nèi)壁滋生微生物。
  解決:每周用70%酒精擦拭內(nèi)腔;每月執(zhí)行高溫濕熱滅菌(如140℃,4小時)或紫外照射。
  原因2:操作不規(guī)范引入污染
  手、工具或培養(yǎng)基未嚴格無菌。
  解決:加強無菌操作培訓(xùn),使用生物安全柜操作。
  原因3:水盤使用自來水
  自來水含礦物質(zhì)與微生物,易滋生藻類。
  解決:必須使用無菌蒸餾水或去離子水。